涉(she)及產品

1. EZ Trans Plus細胞轉染試劑（Ⅱ）　貨(huo)號(hao)：AC04L011

2. EZ Trans細胞轉染試劑（高效）　　貨(huo)號：AC04L091/AC04L092

3. EZ Trans細胞轉染試劑（低毒）　　貨號：AC04L098/AC04L099

其(qi)他轉染產品(pin)

1. EZ Trans Pro細胞轉染試劑（GMP）　貨號：AC04L032/AC04L033/AC04L034

2. EZ Trans RNA轉染試劑　　　　　　　貨號：AC04L051

李記(ji)生物細胞轉染試劑常(chang)見問題（一(yi)）

Q1：李記有3款(kuan)轉染(ran)試劑，這(zhe)3款(kuan)有什(shen)么區別(bie)？和Li**對(dui)比效(xiao)果如何(he)？

A1：我司(si)自行(xing)測(ce)試與收集客戶反饋數(shu)據(ju)，得到類似(si)結論：

　　效率(lv)方面：EZ Trans Plus＞Li**2000≈EZ Trans(高效)＞Li** 3000＞EZ Trans(低毒)

　　毒性方面：EZ Trans(低(di)毒)≈Li**3000＜EZ Trans Plus＜EZ Trans(高效)≈Li**2000

Q2：我們傳的細胞有(you)抗生素(su)，抗生素(su)是(shi)絕對(dui)會(hui)影響轉染效率嗎？

A2：能(neng)不加(jia)盡量不加(jia)，理論上抗生(sheng)素進(jin)(jin)不到細胞內，但(dan)是(shi)在轉染試劑的作用下，細胞的通(tong)透性(xing)增(zeng)加(jia)，抗生(sheng)素可(ke)能(neng)進(jin)(jin)到細胞內，對實驗(yan)結果完成影(ying)響。

Q3：protocol提到(dao)，要用(yong)(yong)Opti-MEM稀(xi)釋質(zhi)粒(li)和轉染(ran)試(shi)(shi)劑。不能用(yong)(yong)1640稀(xi)釋么(me)？另(ling)外質(zhi)粒(li)和轉染(ran)試(shi)(shi)劑為什么(me)要先稀(xi)釋然后再混合？不能把轉染(ran)試(shi)(shi)劑直接加到(dao)質(zhi)粒(li)溶液(ye)中混合，然后再加培養基(ji)稀(xi)釋么(me)？

A3：EZ Trans細(xi)胞轉(zhuan)染液屬于陽離(li)子類型的(de)轉(zhuan)染試劑，它(ta)與DNA形(xing)成復合物(wu)需要一定的(de)條件，在合適的(de)濃度下，有利于陽離(li)子包裹DNA形(xing)成良(liang)好形(xing)態的(de)復合物(wu)進(jin)入(ru)細(xi)胞。

　　如果直接(jie)把兩者直接(jie)混合(he)(he)，兩者容(rong)易很快(kuai)形(xing)成聚(ju)(ju)合(he)(he)物，聚(ju)(ju)集(ji)相態多樣，有(you)可能使(shi)DNA暴露在表(biao)面，不容(rong)易進(jin)入細胞，進(jin)而降低轉染效率。所(suo)以EZ Trans和DNA的混合(he)(he)順序也很重(zhong)要。

　　培(pei)養細胞(bao)大多會用到胎牛(niu)血(xue)(xue)清(qing)，血(xue)(xue)清(qing)成(cheng)分(fen)復雜，沒(mei)有人能說(shuo)清(qing)成(cheng)分(fen)及含(han)量。細胞(bao)轉染(ran)液成(cheng)分(fen)比較(jiao)明(ming)確，但(dan)是(shi)不能確定是(shi)會不會與胎牛(niu)血(xue)(xue)清(qing)的不明(ming)成(cheng)分(fen)結合，事實上(shang)這(zhe)種現(xian)象在大多數轉染(ran)試劑中(zhong)都會造成(cheng)不良影響，所以(yi)在形成(cheng)EZ Trans-DNA復合物過(guo)程中(zhong)要避免血(xue)(xue)清(qing)的影響。

Q4：protocol提到(dao)，“24-48小時內檢測轉染效(xiao)率"指(zhi)的(de)是(shi)去除含(han)復(fu)合物的(de)培養(yang)液(ye)換成(cheng)含(han)血清的(de)培養(yang)基之后的(de)24-48h，還(huan)是(shi)指(zhi)加入復(fu)合物后轉染24-48h？

A4：所有(you)時間都是從EZ Trans-DNA復合物與細胞接觸開始算。

Q5：我就是問的(de)(de)體(ti)內直接轉染小鼠。你(ni)們現(xian)有的(de)(de)protocol是體(ti)外(wai)實(shi)驗(yan)的(de)(de)方法?

A5：體(ti)內(nei)直接轉(zhuan)染目前最多(duo)的(de)(de)是腺(xian)病(bing)毒(du)，慢病(bing)毒(du)，腺(xian)相(xiang)關病(bing)毒(du)。轉(zhuan)染試劑直接在(zai)體(ti)內(nei)用的(de)(de)報道我們目前沒有聽過。現有的(de)(de)做法(fa)是細(xi)胞在(zai)體(ti)外培養(yang)，轉(zhuan)染篩選(xuan)后再(zai)打入體(ti)內(nei)。

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