EZ Trans細胞轉染試劑與EZ 慢病毒系列/真核細胞轉染試劑

轉(zhuan)染試劑產品描述(shu)

EZ Trans細(xi)胞轉(zhuan)染(ran)試劑作為新一(yi)代的轉(zhuan)染(ran)試劑，其轉(zhuan)染(ran)原理(li)是帶正電的陽離子(zi)聚合物與核酸(suan)中帶負(fu)電(dian)的磷酸基團形成帶正電(dian)的復合物后(hou)與細胞(bao)表面帶負(fu)電(dian)的蛋白多糖相(xiang)互作用，并通過胞(bao)吞作用進入細胞(bao)。

本產(chan)品經過李記生物(wu)的(de)優化處理，具(ju)有轉染效(xiao)率(lv)高，細胞毒(du)性低，操(cao)作簡單，重復(fu)性好，適用(yong)范(fan)圍(wei)廣等特點。

以下為高效轉染試劑說明書，EZ Trans細胞轉染試劑與EZ 慢病毒系列/真核細胞轉染試劑/其他產品詳情請問銷售人員。

細胞轉染試劑(ji)與慢病毒訂購信(xin)息

轉染試劑運輸與(yu)保(bao)存

藍冰運輸。4℃保存，有效(xiao)期12個月。【注】：不可冷(leng)凍！

高效轉染試劑使用方法（以 24 孔板為例，其他培(pei)養皿(min)中轉染(ran)請參考表1）

1. 接(jie)種細胞

對(dui)于貼壁細胞(bao)，轉染前18-24 h進行(xing)鋪(pu)板(ban)（不(bu)含抗生(sheng)素），使其在轉染時的(de)密度大(da)約在80%左(zuo)右。對于懸(xuan)浮細胞(bao)，轉染當天，配制EZ Trans-DNA復(fu)合物之前進行鋪板，每500 µL生長培養基中(zhong)加入4~8×10⁵cells。  

【注】：培養液中的(de)血(xue)清不影響轉(zhuan)染效率。轉(zhuan)染試劑使(shi)用量受細胞類(lei)型及其他實(shi)驗(yan)條件影響，建(jian)議(yi)初次使(shi)用時設置梯度進(jin)行優化最佳使(shi)用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物

（1）對于每孔細胞，將1 μg質粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培(pei)養基），混(hun)勻。

（2）對于每(mei)孔細胞，將(jiang)3 μL EZ Trans轉染試劑(ji)稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培(pei)養(yang)基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培(pei)養(yang)基），輕輕混勻。

【注】：無血清的高糖DMEM培(pei)養(yang)基是(shi)稀釋液(ye)，不能使用含(han)血清(qing)的培(pei)養(yang)基進行DNA和EZ Trans轉染(ran)試劑(ji)的稀釋。因(yin)為EZ Trans-DNA轉(zhuan)染復(fu)合物的形成過(guo)程(cheng)不能含有血清。

（3）將稀釋好(hao)的(de)EZ Trans轉(zhuan)染試劑盡快全部(bu)加(jia)入到已稀釋好(hao)的質粒DNA中，輕輕混勻。

【注】：此混(hun)合(he)的順序不能反向(xiang)進行(xing)。

（4）室溫放置(zhi)10-15 min，以(yi)形成(cheng)EZ Trans-DNA復合物(wu)。

3. 轉染細(xi)胞(bao)

（1）將上(shang)述80 μL EZ Trans-DNA轉染復(fu)合物(wu)均(jun)勻滴入到含細胞的培(pei)養(yang)皿(min)中。輕(qing)輕(qing)晃動(dong)培(pei)養(yang)皿(min)或輕(qing)微振(zhen)蕩(dang)，讓EZ Trans-DNA復(fu)合物(wu)分(fen)散均(jun)勻。

（2）在37℃，5% CO₂培養(yang)箱培養(yang)6-18 h，去除(chu)含(han)EZ Trans-DNA復合物(wu)的培養(yang)液(ye)，更(geng)換新的培養(yang)液(ye)，繼續培養(yang)至對轉(zhuan)入(ru)基因表達分(fen)析。

【注】：篩選穩定轉染細(xi)胞株，轉染細(xi)胞24 h后，將細胞(bao)傳代(dai)至新鮮的生長培養基(ji)中（將細胞(bao)稀釋10倍以(yi)上），在37℃，5% CO2培養(yang)箱中孵育24 h，加入(ru)篩(shai)(shai)(shai)選(xuan)(xuan)培養(yang)基。在有轉染抗性(xing)基因相(xiang)匹配的(de)藥(yao)物(wu)篩(shai)(shai)(shai)選(xuan)(xuan)條件下，約 1～2周可(ke)篩(shai)(shai)(shai)選(xuan)(xuan)到耐藥(yao)性(xing)克隆，在這期間需經常更(geng)換含篩(shai)(shai)(shai)選(xuan)(xuan)藥(yao)物(wu)的(de)生長(chang)培養(yang)基。

注意(yi)事項

1. 本產(chan)品僅限于科(ke)學實驗研究使用(yong)，不得用(yong)于臨床(chuang)診(zhen)斷、治療(liao)等領域(yu)。

公司簡介

　　上海李(li)記生(sheng)物(wu)科技有(you)限公(gong)司是一(yi)家集研發、生(sheng)產、銷售(shou)為一(yi)體(ti)的高科技生(sheng)物(wu)技術企(qi)業，產品(pin)涵(han)蓋細胞生(sheng)物(wu)學、分子生(sheng)物(wu)學、動物(wu)學等(deng)，我(wo)們(men)的產品(pin)都基于設計，在保證品(pin)質的前提下(xia)，具有(you)易用、經濟、高效的特點(dian)。
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　　李記(ji)優勢(shi)產品：蛋白(bai)Marker、EZ Trans細胞(bao)轉(zhuan)染液(ye)、CCK-8細胞活性(xing)增殖檢測試劑、支原體(ti)快(kuai)速檢測試劑盒(he)、核酸染(ran)料（GelRed）、EZ Protein any KD PAGE蛋(dan)白(bai)電泳試劑盒、熒光染料（Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5）、胎牛血清、細胞凋亡檢(jian)測試(shi)劑盒等。

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