EZ Cell Transfection Reagent，EZ Trans細胞轉染試劑（低毒）/低毒細胞轉染試劑

轉染試劑產(chan)品描(miao)述

EZ Trans細(xi)胞轉染試劑（低毒），作為新(xin)一代的(de)(de)轉染(ran)(ran)試劑(ji)，其轉染(ran)(ran)原理是帶(dai)正(zheng)電的(de)(de)陽離子聚合物與核酸(suan)中(zhong)帶(dai)負電的磷(lin)酸基團形成帶(dai)正電的復合(he)物后(hou)與(yu)細胞(bao)(bao)表面(mian)帶(dai)負電的蛋白多糖(tang)相(xiang)互(hu)作用，并通過胞(bao)(bao)吞作用進(jin)入細胞(bao)(bao)。

本產品經過李記生物的優化處理，具有轉染效率高，細胞毒性低，操作簡單，重復性好，適用范圍廣等特點。

以下為(wei)低毒轉染試劑(ji)說明書，其他產品詳情請問(wen)銷售人(ren)員。

細胞轉染試(shi)劑(ji)與慢病(bing)毒訂(ding)購信(xin)息(xi)

轉染試劑運輸與保存(cun)

藍冰運輸(shu)。4℃保(bao)存，有(you)效期12個月。【注】：不(bu)可冷凍！

轉染(ran)試劑(ji)使用方法(fa)（以 24 孔板為例，其他培養皿中轉染(ran)請參(can)考表1）

1. 接(jie)種細胞

對于貼壁細(xi)胞，轉染前18-24 h進行鋪(pu)板(ban)（不含抗生素），使其在轉(zhuan)染時的(de)密度大約在80%左右。對(dui)于懸浮細(xi)胞，轉染當天，配制EZ Trans-DNA復合(he)物之前(qian)進行(xing)鋪板，每500 µL生長培(pei)養基中加入4~8×10⁵cells。  

【注】：培養(yang)液中(zhong)的血清不影(ying)響(xiang)轉染(ran)效率。轉染(ran)試劑使(shi)用量受細胞類型及其他實(shi)驗條(tiao)件影(ying)響(xiang)，建議初次(ci)使(shi)用時設置梯(ti)度進(jin)行優(you)化最佳使(shi)用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物

（1）對(dui)于每(mei)孔(kong)細胞，將1 μg質粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖(tang)DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基），混勻。

（2）對于(yu)每(mei)孔細胞，將3 μL EZ Trans轉染試劑稀釋到40 μL無血(xue)清的(de)高(gao)糖DMEM培養基(ji)（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基(ji)），輕(qing)輕(qing)混勻。

【注】：無血清的高糖DMEM培養基是稀(xi)釋(shi)液(ye)，不能使(shi)用(yong)含血(xue)清的培養基進行DNA和(he)EZ Trans轉染試劑的稀(xi)釋(shi)。因為EZ Trans-DNA轉(zhuan)染復(fu)合物(wu)的形(xing)成過程(cheng)不能含有(you)血清。

（3）將稀釋好的EZ Trans轉(zhuan)染試劑盡快全部(bu)加(jia)入到(dao)已稀釋好的質(zhi)粒DNA中，輕輕混勻(yun)。

【注】：此(ci)混合(he)的順序不能(neng)反向(xiang)進行(xing)。

（4）室溫放置(zhi)10-15 min，以(yi)形成EZ Trans-DNA復合物(wu)。

3. 轉染(ran)細胞

（1）將上述80 μL EZ Trans-DNA轉染復合物均(jun)勻(yun)滴(di)入到含細胞的(de)培養(yang)皿中。輕(qing)輕(qing)晃動(dong)培養(yang)皿或輕(qing)微振蕩，讓EZ Trans-DNA復合物分散均(jun)勻(yun)。

（2）在37℃，5% CO₂培養箱(xiang)培養6-18 h，去除含EZ Trans-DNA復合(he)物的培(pei)養液，更(geng)換新(xin)的培(pei)養液，繼續培(pei)養至對轉入基因(yin)表達分析。

【注】：篩(shai)選穩定轉染細(xi)胞株，轉染細(xi)胞24 h后，將細(xi)胞傳(chuan)代(dai)至新鮮的生長培養基中（將細(xi)胞稀釋10倍以(yi)上），在37℃，5% CO2培(pei)養箱中孵(fu)育(yu)24 h，加入篩(shai)選培(pei)養基。在有轉染(ran)抗性(xing)基因相匹配的藥物篩(shai)選條件(jian)下，約 1～2周(zhou)可篩(shai)選到(dao)耐藥性(xing)克隆，在這(zhe)期間需經常(chang)更(geng)換含篩(shai)選藥物的生長培(pei)養基。

公司簡(jian)介

　　上海李記(ji)生(sheng)物(wu)科技有限公司是一家集研發、生(sheng)產、銷售為(wei)一體的(de)(de)高(gao)科技生(sheng)物(wu)技術企業，產品(pin)(pin)涵蓋細胞生(sheng)物(wu)學(xue)、分子生(sheng)物(wu)學(xue)、動物(wu)學(xue)等，我們的(de)(de)產品(pin)(pin)都基(ji)于設計，在保證品質的前提下，具有易用、經濟、高效的特點。
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